Toxins from the Caribbean sea anemone Bunodeopsis globulifera increase cisplatin-induced cytotoxicity of lung adenocarcinoma cells

Lung cancer causes 1.4 million deaths worldwide while non-small-cell lung cancer (NSCLC) represents 80-85% of the cases. Cisplatin is a standard chemotherapy against this type of cancer; however, tumor cell resistance to this drug limits its efficacy. Sea anemones produce compounds with pharmacological activities that may be useful for augmenting cisplatin efficacy. This study aimed to evaluate the pharmacological activities of crude venom (CV) from the sea anemone Bunodeopsis globulifera and four derived fractions (F1, F2, F3 and F4) to test their increase efficiency cisplatin cytotoxicity in human lung adenocarcinoma cells. Results Pre-exposure to CV, F1 and F2 fractions increases cisplatin cytotoxicity in human lung adenocarcinoma cells under specific conditions. Exposure to CV at 50 μgmL-1 induced a reduction of approximately 50% in cell viability, while a similar cytotoxic effect was observed when cell culture was exposed to F1 at 25 μgmL -1 or F2 at 50 μgmL-1. The cell culture exposure to F1 (10 μgmL-1) fraction combined with cisplatine (25 μM) provoked a decrease in MTT reduction until 65.57% while F2 (25 μgmL-1) fraction combined with cisplatin (10 μM) provoked a decrease in MTT reduction of 72.55%. Conclusions The F1 fraction had the greatest effect on the lung adenocarcinoma cell line compared with CV and F2. The combination of antineoplastic drugs and sea anemone toxins might allow a reduction of chemotherapeutic doses and thus mitigate side effects.

Detección de bacillus cereus toxigénicos en productos lácteos con especias y leches deshidratadas colectadas en Costa Rica / Toxigenic bacillus cereus detection in lactic products with spices and dehydrated milk collected in Costa Rica

Bacillus cereus es un bacilo Gram-positivo de amplia distribución en la naturaleza y asociado a diversos tipos de alimentos que, bajo ciertas circunstancias causa patologías de diversa índole. Se han descrito cepas diarrogénicas y eméticas basándose en el tipo de toxinas producidas. Con el fin de determinar el riesgo de salud que representa en esta bacteria, se determinó el potencial toxigénico de cepas aisladas a partir de quesos maduros con especias, quesos crema con especias y leches deshidratadas expendidas en San José, Costa Rica, mediante un PCR múltiple con oligonucleótidos específicos para los genes codificantes de las toxinas HBL y Nhe. A partir de 45 muestras recolectadas, se obtuvieron 15 aislamientos de B. cereus, (60 por ciento provenientes de queso crema con especias, 7 por ciento de leche deshidratada y 13 por ciento de queso maduro con especias). Todas las cepas estudiadas presentaron al menos uno de los genes analizados, seis de ellas provenientes de leches deshidratadas y quesos crema, exhibieron evidencia molecular de los genes nheB, nheA, nheC, hblD, hblA y hblC lo cual permite confirmar la correlación descrita para la presencia de los operones codificantes para la HBL y la Nhe. No obstante, la no detección de un gen no puede considerarse como prueba definitiva de su ausencia dado que existen polimorfismos en las secuencias de los genes aquí analizados. Los resultados demuestran que múltiples cepas de B. cereus encontradas en lácteos comprados en Costa Rica contienen los genes necesarios para sintetizar toxinas, por lo tanto es importante el manejo adecuado de estos productos ya que eventualmente pueden representar un riesgo para la salud pública.

Bacillus cereus is a Gram positive rod widely distributed in nature and associated to different types of food that, under some circumstances, may cause pathology to human beings. Diarrheic and emetic strains have been described based on the type of toxins produced. In order to determine the risk to health represented by this bacteria, the toxigenic potential of strains isolated from cheese with spices, spread cheese with spices and dehydrated milk, all sold in San José, Costa Rica, were determined using a multiplex PCR technique with oligonucleotides specific for the genes coding toxins HBL and Nhe. From 45 samples collected, 15 isolates of B cereus were obtained (60 percent coming from spread cheese with spices 7 percent from dehydrated milk and 13 percent from cheese with spices). All the strains analyzed presented at least one of the genes analyzed; six of them, coming from dehydrated milk and spread cheese, showed molecular evidence of the genes nheB, nheA, nheC, hblD, hblA y hblC, confirming the correlation described for the presence of operons codifying for HBL and Nhe. Nevertheless, the no detection of a gene cannot be considered as a definitive proof of its absence, given the existence of polymorphism in the sequences of the genes analyzed. The results obtained show that multiple of the B cereus strains found in lactic products from Costa Rica have the necessary genes for synthesizing toxins, so the correct handling of these products is very important since they can represent a risk for public health.

Efeitos das microcistinas sobre funções de neutrófilos / Effects of microcystins on functions of neutrophils

Microcistinas (MCs) são heptapeptídeos cíclicos produzidos por cianobactérias e possuem potente hepatotoxicidade e atividade promotora de tumor. Em intoxicações agudas induzidas por MCs ocorre infiltração leucocitária no foco inflamatório. Embora os mecanismos de hepatotoxicidade não são claros, o recrutamento de neutrófilos no fígado pode contribuir ao dano tecidual e desenvolvimento tumoral causados por xenobióticos. O objetivo dessa tese foi investigar os efeitos de três estruturalmente distintas MCs (MC-LA, MC-YR e MC-LR) nas seguintes funções de neutrófilos: síntese e expressão de moléculas de adesão, rolamento, adesão, migração e liberação de citocinas e de ROS. Nos ensaios de migração em bolsa de ar, as três MCs induziram similarmente a migração leucócitos in vivo em tecido subcutâneo de ratos e diferencialmente a secreção citocinas pró-inflamatórias (CINC, IL-1β, TNF-α, VEGF-α e MIP) no exsudato. Concentrações elevadas de CINC-2αβ foram encontradas nos exsudatos inflamatórios de animais após injeção de MC-LA, MC-LR ou MC-YR. MIP-2 elevou-se apenas em exsudatos de animais expostos a MC-LR. Não foram observadas alterações em secreção de IL-1β, TNF-α e VEGF-α...

Evaluation of experimental conditions for quantification of LT produced by human derived enterotoxigenic Escherichia coli strains

The heat-labile toxin (LT) is a key virulence-associated factor associated with the non-invasive secretory diarrhea caused by enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) strains either in humans or domestic animals. Several LT detection methods have been reported but quantification of the toxin produced by wild-type ETEC strains is usually performed by the GM1 ganglyoside enzyme-linked immunosorbent assay (GM1 ELISA). In this study we conducted the optimization of an alternative LT-quantification method, the antibody-capture ELISA (cELISA). Detailed analysis of the appropriate dilutions of capture and detecting LT-specific antibodies significantly improved the sensitivity of the method. Additionally, testing of different LT extraction techniques indicated that sonic disruption of the bacterial cells enhanced LT recovery yields, in contrast to the usual procedure based on addition of polymyxin B to the culture medium as well as extraction methods based on chloroform or Triton X-100. Moreover, the present data indicate that performance of the LT extraction method based on polymyxin B treatment can vary among wild ETEC strains.

A toxina termo-lábil (LT) é um fator de virulência associado à diarréia secretora não invasiva causada por linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em humanos ou animais domésticos. Diversos métodos de detecção de LT foram descritos na literatura, no entanto, a quantificação da toxina produzida por linhagens selvagens de ETEC é geralmente realizada por ensaio imunoenzimático com o gangliosídeo GM-1 (GM-1 ELISA). Neste estudo, conduzimos uma otimização experimental de um método alternativo de quantificação de LT, o ELISA de captura (cELISA). Análise detalhada de diluições apropriadas dos anticorpos LT específicos de captura e detecção melhorou significantemente a sensibilidade do método. Em adição, testes com diferentes técnicas de extração de LT indicaram que a ruptura das células por ultra-som, mas não o tratamento com polimixina B, clorofórmio ou Triton X-100, aumentou o rendimento da recuperação de LT. Além disto, os dados apresentados demonstram que o desempenho do método de extração de LT baseado no tratamento com polimixina B pode variar entre linhagens selvagens de ETEC.

Complex dynamics of toxin producing algal species and primary productivity in two water ponds of Faizabad.

In order to develop a method of predicting and assessing pond eutrophication, which is a serious environmental problem, and to propose effective measure of improvement of water quality. The present study was performed to measure water quality variables, primary productivity, chl-a and biomass of toxin producing algal species and fish production. High nutrient influx and toxin producing algal species have been observed during June 1999 to May 2000 in two water bodies [Girija Kund (A) and Maqubara pond (B)] of Faizabad. The maximum chl-a concentration, toxins producing algal species biomass were found to be 415.00 and 515.00 in pond A, while 451.00 microg/l and 541.22 mg/l in pond B, respectively in the case of Microcystis aeruginosa. Ecological parameters to evaluate GPP, NPP and CR were found to be 297.00, 134.000 and 182.00 mgCm3/h in summer season in pond B, respectively which is higher than pond A. A poor association existed between chl-a and GPP. Temporal variation (Photosynthetic rate) in A(max) & P(max) was also observed to evaluate the productivity of pond. Annual fish production potential of the ponds A and B has been estimated to be around 342.00 Kg and 204. 00 Kg, respectively which may be due to the presence of toxin producing algal species.

Detecçäo de toxinas (microcistinas) produzidas por cianobactérias (algas azuis) em represas para abastecimento público, pelo método de imunoadsorçäo ligado à enzima (ELISA) / Detection of the toxins (microcystins) produced by cyanobacterias (blue algaes) in reservoirs for public provision for immunosorbrnte assay method linked the enzyme (ELISA) and chemical identification

O presente trabalho de pesquisa teve como objetivo a detecçäo de toxinas, microcistinas, produzidas por cianobactérias, ou algas azuis, na água e plâncton de represas para abastecimento público. A metodologia utilizada para este fim foi a de imunoadsorçäo ligada à enzima por competiçäo direta (ELISA). O cultivo de linhagens de cianobactérias tóxicas, mais especificamente do gênero Microcystis, foi realizado com o intuito de se obter suficiente biomassa, utilizada no processo de extraçäo e purificaçäo das microcistinas. A extraçäo das microcistinas por meio de álcoois e "clean up" do extrato obtido foi necessário para a separaçäo e purificaçäo cromatográfica realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A identificaçäo química das microcistinas foi realizada pelo conhecimento da constituiçäo dos aminoácidos e peso molecular. Os métodos empregados foram os de análise de aminoácidos por HPLC e espectrometria de massa por bombardeamento atômico rápido (FABMS). A presença das microcistinas foi constatada nas amostras de água e plâncton coletadas em diferentes represas, sendo que duas linhagens de cianobactérias tóxicas, identificadas como BRJU20a e BRAM 9 foram cultivadas e estudadas em relaçäo aos seus análogos da microcistina. Os análogos da microcistina que foram encontrados nestas linhagens säo a microcistina-LR, microcistina-RR, microcistina-YR, microcistina-FR e seus análogos demetilados, como a [D- 'Asp POT. 3'] microcistina-LR, [D- 'Asp POT.3'] microcistina-RR e [D- 'Asp POT. 3'] microcistina-YR. Os resultados obtidos com o presente trabalho de pesquisa comprovam a existência de toxinas, microcistinas, produzidas por cianobactérias em águas de represas para fins de abastecimento público. Este dado endossa a importância de se desenvolver um programa de monitorizaçäo das toxinas, iniciando-o pelas microcistinas, avaliando-se o risco do consumo de água na saúde humana

Estudio preliminar de la composición química de la toxina de paederus irritans chapin, 1926 (coleopera, staphylinidae) / Preliminar study of the chemical composition of the toxin of paederus irritans chapin, 1926 (coleoptera, staphylinidae)

Se hace un estudio preliminar de la composición química de la toxina de Paederus irritans, Chapin, 1926 (Coleoptera, Staphylinidae), agente causal de lesiones cutáneas de lenta cicatrización en los pobladores de la zona norte del Perú. Con el test de ninhidrina y los métodos de diálisis y Sickevitz encontramos en la toxina un alto contenido de aminoácidos de elevado peso molecular, termoestables.

Toxinas (urêmicas) presentes na insuficiência renal crônica / Uremic toxins in chronic renal failure

As toxinas componentes do complexo urêmico säo, até os dias atuais, motivo de controvérsias. Os autores fazem uma atualizaçäo e revisäo a respeito das toxinas conhecidas, até hoje, dando ênfase às implicaçöes fisiopatogênicas, dentro da síndrome urêmica